HPLC法测定胃宁冲剂中丹参素的含量
作者：陈志清 钟克俭
单位：陈志清 姜堰 225500 江苏苏中制药厂；钟克俭 姜堰 225500 江 苏姜堰人民医院
关键词：
中国现代应用药学990123 胃宁冲剂系由丹参、党参等12味中药用水煎煮提取浓缩制粒而成。成份复杂 ，而丹参是其主药，主要活性成份为丹参素。本文采用HPLC法对丹参素的含量进行测定，以 期能有效地控制胃宁冲剂的质量。
1 仪器与设备
1.1 美国Waters高效液相色谱仪；Waters486紫外检测器；DL-800色谱工作站。
1.2 丹参素钠对照品(上海医科大学)；甲醇、醋酸均为分析纯。
, http://www.100md.com 1.3 胃宁冲剂样品(江苏苏中制药厂，批号：970527，970528，970529) 。
2 色谱分析条件
色谱柱Waters C18(3.9× 150mm);流动相：甲醇-0.4%醋酸溶液(5∶95);检测波长:281nm;柱温:室温；流速：1.2ml/mi n;按该条件测定样品中的丹参素与其它相关成分能达到基线分离，理论板数为11600,，分离 度为4.1。经多次实验，当理论板数为8000时，丹参素仍能较好分离，规定理论板数应不少 于8000。对照品及样品色谱图见图1。
3 方法及结果
3.1 对照品丹参素钠的纯度测定：取丹参素钠对照品约6mg,置100ml量瓶中加水至刻度，摇匀 ，依上述条件进样100μl,采样时间为1h,以峰面积归一化法计算，丹参素钠的含量为99.61% 。
, 百拇医药
图1 对照品色谱图 样品色谱图
a-丹参素
3.2 对照品溶液的制备：取丹参素钠对照品(约相当于丹参素10mg), 精密称定，置10ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
3.3 标准曲线的制备：分别精密吸取对照品溶液0.2,0.4,0.6,0.8,1.0和1.2ml置10ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。依上述条件取10μl注入色谱仪，记录色谱图 ，以对照品浓度为横坐标，对照品峰面积积分值为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程：Y=2.45X+1.163,r=0.9994。丹参素浓度在20～120μg/ml范围内峰面积积分值 与浓度呈良好的线性关系。
3.4 样品的测定：取样品约0.5g,精密称定 ，置50ml量瓶中，加水适量，超声处理30min,取出，放冷至室温，用水稀释至刻度，摇匀， 滤过，弃去初滤液，取续滤液作为供试品溶液。按上述条件取供试品溶液10μl进行分析， 结果见表1。表1 胃宁冲剂中丹参素的含量(n=3 ) 批 号
, 百拇医药
含量(%)
RSD (%)
970527
0.232
0.83
970528
0.218
0.68
970529
0.281
1.24
3.5 稳定性试验：取样品依本法进行处理后，每间隔1h测定一次含量， 结果表明样品中丹参素含量在24h内几乎没有变化。
, 百拇医药
3.6 重现性试验： 取同一批号样品5份，分别依本法处理进行测定，结果见表2。表2 重现性试验结果 编 号
含量(%)
平均含量(%)
RSD( %)
1
0.231
2
0.223
3
0.226
0.225
1.59
, 百拇医药
4
0.222
5
0.224
3.7 回收率试验：精密称取已知含量的样品适量，精密加入一定量的丹 参素对照品，依本法进行含量测定并计算回收率，结果见表3。表3 回收率试验结果(n=6) 样品中丹参
素含量(mg)
加入丹参
素量(mg)
测得丹参
素量(mg)
回收率
, 百拇医药
(%)
平均回收率(%)
RSD
(%)
0.626
1.116
100.90
0.634
1.094
98.20
0.587
1.057
99.06
, 百拇医药
0.652
0.480
1.144
101.06
100.54
1.56
0.645
1.149
102.13
0.598
1.098
101.86
4 讨 论
, 百拇医药
4.1 丹参为处方中主药成份，其水溶性有 效成份有丹参素，原儿茶醛，原儿茶酸等，据文献报道[1]丹参素含量较高，故选 择测定丹参素含量，作为胃宁冲剂的含量指标。丹参素的测定方法有纸层析紫外分 光光度法[2]、薄层扫描法[3]和高效液相色谱法[4，5]等，大多 测定的是药材、单方制剂或两味的复方制剂。胃宁冲剂成份复杂，有效成份分离比较困难， 选用本法可同时达到分离测定的目的。
4.2 由于丹参素钠对照品的水 溶液不够稳定，为此，在测定过程中丹参素钠对照品溶液应临用现配为好。
参考文献
[1] 倪坤仪，张国清.反相高效液相色谱测定丹参注射液的三 种有效成份.药学学报，1988，23(4)∶293.
[2] 何怀冰，秦芝玲，张德成，等.纸层析紫外分光 光度法测定丹参注射液中丹参素的含量.药物分析杂志，1984，4(4)∶212.
[3] 倪坤仪，张雨梅，于如霞，等.薄层扫描测定丹参注射剂 中水溶性成份.南京药学院学报，1986，17∶265.
[4] 王杰民，何怀冰，竺叶青，等.RP-HPLC法测定丹参药材 中丹参素及原儿茶醛含量.上海医科大学学报，1991，18(1)∶27.
[5] 盛景芬，徐晓华.高效液相色谱法测定丹参注射液中的原 儿茶醛和丹参素.中成药研究，1987，7∶14.
收稿日期：1997-11-28, http://www.100md.com
单位：陈志清 姜堰 225500 江苏苏中制药厂；钟克俭 姜堰 225500 江 苏姜堰人民医院
关键词：
中国现代应用药学990123 胃宁冲剂系由丹参、党参等12味中药用水煎煮提取浓缩制粒而成。成份复杂 ，而丹参是其主药，主要活性成份为丹参素。本文采用HPLC法对丹参素的含量进行测定，以 期能有效地控制胃宁冲剂的质量。
1 仪器与设备
1.1 美国Waters高效液相色谱仪；Waters486紫外检测器；DL-800色谱工作站。
1.2 丹参素钠对照品(上海医科大学)；甲醇、醋酸均为分析纯。
, http://www.100md.com 1.3 胃宁冲剂样品(江苏苏中制药厂，批号：970527，970528，970529) 。
2 色谱分析条件
色谱柱Waters C18(3.9× 150mm);流动相：甲醇-0.4%醋酸溶液(5∶95);检测波长:281nm;柱温:室温；流速：1.2ml/mi n;按该条件测定样品中的丹参素与其它相关成分能达到基线分离，理论板数为11600,，分离 度为4.1。经多次实验，当理论板数为8000时，丹参素仍能较好分离，规定理论板数应不少 于8000。对照品及样品色谱图见图1。
3 方法及结果
3.1 对照品丹参素钠的纯度测定：取丹参素钠对照品约6mg,置100ml量瓶中加水至刻度，摇匀 ，依上述条件进样100μl,采样时间为1h,以峰面积归一化法计算，丹参素钠的含量为99.61% 。
, 百拇医药
图1 对照品色谱图 样品色谱图
a-丹参素
3.2 对照品溶液的制备：取丹参素钠对照品(约相当于丹参素10mg), 精密称定，置10ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
3.3 标准曲线的制备：分别精密吸取对照品溶液0.2,0.4,0.6,0.8,1.0和1.2ml置10ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。依上述条件取10μl注入色谱仪，记录色谱图 ，以对照品浓度为横坐标，对照品峰面积积分值为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程：Y=2.45X+1.163,r=0.9994。丹参素浓度在20～120μg/ml范围内峰面积积分值 与浓度呈良好的线性关系。
3.4 样品的测定：取样品约0.5g,精密称定 ，置50ml量瓶中，加水适量，超声处理30min,取出，放冷至室温，用水稀释至刻度，摇匀， 滤过，弃去初滤液，取续滤液作为供试品溶液。按上述条件取供试品溶液10μl进行分析， 结果见表1。表1 胃宁冲剂中丹参素的含量(n=3 ) 批 号
, 百拇医药
含量(%)
RSD (%)
970527
0.232
0.83
970528
0.218
0.68
970529
0.281
1.24
3.5 稳定性试验：取样品依本法进行处理后，每间隔1h测定一次含量， 结果表明样品中丹参素含量在24h内几乎没有变化。
, 百拇医药
3.6 重现性试验： 取同一批号样品5份，分别依本法处理进行测定，结果见表2。表2 重现性试验结果 编 号
含量(%)
平均含量(%)
RSD( %)
1
0.231
2
0.223
3
0.226
0.225
1.59
, 百拇医药
4
0.222
5
0.224
3.7 回收率试验：精密称取已知含量的样品适量，精密加入一定量的丹 参素对照品，依本法进行含量测定并计算回收率，结果见表3。表3 回收率试验结果(n=6) 样品中丹参
素含量(mg)
加入丹参
素量(mg)
测得丹参
素量(mg)
回收率
, 百拇医药
(%)
平均回收率(%)
RSD
(%)
0.626
1.116
100.90
0.634
1.094
98.20
0.587
1.057
99.06
, 百拇医药
0.652
0.480
1.144
101.06
100.54
1.56
0.645
1.149
102.13
0.598
1.098
101.86
4 讨 论
, 百拇医药
4.1 丹参为处方中主药成份，其水溶性有 效成份有丹参素，原儿茶醛，原儿茶酸等，据文献报道[1]丹参素含量较高，故选 择测定丹参素含量，作为胃宁冲剂的含量指标。丹参素的测定方法有纸层析紫外分 光光度法[2]、薄层扫描法[3]和高效液相色谱法[4，5]等，大多 测定的是药材、单方制剂或两味的复方制剂。胃宁冲剂成份复杂，有效成份分离比较困难， 选用本法可同时达到分离测定的目的。
4.2 由于丹参素钠对照品的水 溶液不够稳定，为此，在测定过程中丹参素钠对照品溶液应临用现配为好。
参考文献
[1] 倪坤仪，张国清.反相高效液相色谱测定丹参注射液的三 种有效成份.药学学报，1988，23(4)∶293.
[2] 何怀冰，秦芝玲，张德成，等.纸层析紫外分光 光度法测定丹参注射液中丹参素的含量.药物分析杂志，1984，4(4)∶212.
[3] 倪坤仪，张雨梅，于如霞，等.薄层扫描测定丹参注射剂 中水溶性成份.南京药学院学报，1986，17∶265.
[4] 王杰民，何怀冰，竺叶青，等.RP-HPLC法测定丹参药材 中丹参素及原儿茶醛含量.上海医科大学学报，1991，18(1)∶27.
[5] 盛景芬，徐晓华.高效液相色谱法测定丹参注射液中的原 儿茶醛和丹参素.中成药研究，1987，7∶14.
收稿日期：1997-11-28, http://www.100md.com